Milieu DMEM/F12 (milieu Eagle modifié F12 de Dulbecco)

Le milieu DMEM/F12 est souvent utilisé comme base pour le développement d'un milieu sans sérum, qui convient à la culture de cellules de mammifères à faible teneur en sérum et à la culture de densité clonale. Le milieu de culture sans glucose permet d'ajuster la concentration de glucose à volonté selon les besoins de la recherche, pratique et rapide.

Ingrédients du milieu DMEM/F12

L-glutamine (Glutamine)

La L-glutamine (Glutamine) est un élément nutritif essentiel dans la culture cellulaire, mais elle est instable en solution et se dégrade spontanément. La quantité de L-glutamine peut être arbitrairement ajustée en fonction des besoins de recherche du milieu sans L-glutamine, et l'ajout de L-glutamine fraîche ou de ses substituts au moment de l'utilisation est plus bénéfique pour la croissance cellulaire.

La L-alanyl-L-glutamine (Ala-Glu), également connue sous le nom d'alanyl-glutamine et d'alanyl-glutamyl dipeptide, est un additif de culture cellulaire avancé qui peut remplacer directement la L-glutamine dans le milieu de culture cellulaire. La l-glutamine est un nutriment essentiel dans la culture cellulaire, mais elle est instable en solution et sera cependant instable en solution et se dégrade spontanément pour produire de l'ammoniac et de l'acide pyroglutamique, dont l'ammoniac est nocif pour les cellules, alors que la L-alanyl- La L-glutamine est très stable en solution aqueuse et ne se dégrade pas spontanément. Le mécanisme d'utilisation cellulaire est que pendant la culture cellulaire, les cellules libèrent progressivement une peptidase dans le milieu de culture pour hydrolyser le L-alanyl-L-glutamyle en L-alanine et L-glutamine, puis les cellules absorbent et utilisent ces deux hydrolyses. des produits. Le processus d'utilisation cellulaire du L-alanyl-L-glutamyl est similaire à la stratégie de culture par addition en flux, en ce que de faibles niveaux de L-glutamine sont continuellement ajoutés au milieu de culture, augmentant ainsi l'utilisation de la L-glutamine sans générer d'excès. l'ammoniac, qui est plus propice à la croissance cellulaire. Le L-alanyl-L-glutamyl peut remplacer la L-glutamine équimolaire, convient à toutes les cellules, nécessite peu d'adaptation et peut prolonger le temps de culture cellulaire. Il peut également prolonger le temps de culture cellulaire et réduire le nombre de passages, ce qui permet d'économiser du temps et de l'argent. Les cellules cultivées dans un milieu additionné de L-glutamine ont montré une réduction d'activité plus lente que celles cultivées dans un milieu additionné de L-glutamine. La période de retard légèrement plus longue est due au temps nécessaire à la libération de la peptidase et à la digestion du dipeptide.

HEPES

L'HEPES est un excellent tampon biologique, qui n'a aucun effet toxique sur les cellules. Le milieu avec HEPES peut maintenir une plage de pH constante pendant une plus longue période, ce qui peut empêcher efficacement la croissance cellulaire d'être affectée par de grandes fluctuations de pH du milieu de culture. Il peut être utilisé dans des incubateurs sans CO2.

Solution de pénicilline-streptomycine

La solution de pénicilline-streptomycine, également appelée «antibiotique double», est l'antibiotique le plus couramment utilisé dans la culture in vitro pour prévenir la contamination microbienne, dans laquelle la pénicilline interfère avec la synthèse de la paroi cellulaire bactérienne et est particulièrement efficace contre les bactéries Gram-positives, tandis que la streptomycine inhibe la synthèse des protéines bactériennes en se liant à la sous-unité 30S du ribosome bactérien et est particulièrement efficace contre la streptomycine se lie à la sous-unité 30S du ribosome bactérien et inhibe la synthèse des protéines bactériennes, qui est efficace contre les bactéries Gram-négatives et Gram-positives, mais est particulièrement efficace contre les bactéries Gram-négatives. La combinaison de pénicilline et de streptomycine peut prévenir la plupart des contaminations bactériennes.

Ce produit contient des acides aminés, des vitamines, des sels inorganiques et de nombreux autres composants nécessaires à la culture multiple de cellules, mais ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Le produit doit donc être utilisé avec du sérum ou des additifs sans sérum.

Précautions concernant IMDM DMEM/F12 Medium

• Ce produit a été filtré et débactérisé et doit être utilisé avec précaution pour un fonctionnement aseptique afin d'éviter toute contamination.
• Ne pas congeler-décongeler le produit afin de conserver la meilleure utilisation du produit.
• Ce produit est destiné à la recherche scientifique ou à des études ultérieures uniquement, et non à des fins de diagnostic ou de traitement.