Kit d'extraction d'ADN et d'ARN HCY™ 96

Bien sûr. Laissez-moi vous fournir des informations détaillées sur le Kit d'extraction d'ADN/ARN HCY™ 96.

Il s'agit d'un kit d'extraction d'acide nucléique à haut débit conçu pour être utilisé dans les laboratoires qui traitent un grand nombre d'échantillons, comme dans les diagnostics cliniques, la détection d'agents pathogènes et la recherche génomique.

Voici une description complète de ses fonctionnalités, de son principe, de sa procédure typique et de ses applications.

Vue d'ensemble

L'espace Kit d'extraction d'ADN/ARN HCY™ 96 est une à base de billes magnétiques système de purification formaté pour plaques 96 puits. Il permet la purification simultanée de à la fois l'ADN et l'ARN à partir d'un échantillon unique dans un flux de travail automatisé ou semi-automatisé. Ceci est crucial pour des applications comme la détection d'agents pathogènes (par exemple, SARS-CoV-2, grippe, virus respiratoire syncytial), où les tests de cibles multiples à partir d'un même échantillon sont courants.

Fonctionnalités clés

1. Haut débit : Conçu pour les plaques 96 puits, il est idéal pour le traitement simultané de 96 échantillons. Il est compatible avec les plateformes automatisées de manipulation de liquides et les processeurs de billes magnétiques.
2. Extraction double : Co-extrait efficacement les deux ADN génomique et ARN total à partir d'un seul lysat d'échantillon. Cela permet d'économiser du temps, des réactifs et du matériel d'échantillon.
3. Technologie des billes magnétiques : Utilise une matrice de billes magnétiques à base de silice pour lier les acides nucléiques. Cette méthode est reconnue pour sa grande pureté, son rendement et sa facilité d'automatisation par rapport aux méthodes traditionnelles sur colonne de centrifugation.
4. Haute pureté et rendement : Les tampons optimisés et les étapes de lavage éliminent les inhibiteurs tels que les protéines, les sels et autres contaminants, ce qui permet d’obtenir de l’ADN et de l’ARN de haute qualité adaptés aux applications sensibles en aval.
5. Procédure rapide : L’ensemble du processus peut être réalisé en 20 à 40 minutes pour une plaque complète de 96 puits, selon l’équipement d’automatisation utilisé.
6. Large compatibilité des échantillons : Peut être utilisé avec une variété de types d’échantillons, notamment :
   • Échantillons par écouvillonnage (nasopharyngé, oropharyngé)
   • Sérum / Plasma
   • Surnageants de culture cellulaire
   • homogénats de tissus
   • Fluides corporels

Principe de la méthode

Le kit fonctionne sur le principe de purification d'acide nucléique par billes magnétiques de silice:

1. Lyse : L'échantillon est lysé avec un tampon salin chaotropique fort (contenant généralement de la guanine-HCl ou du thiocyanate de guanine). Ce tampon dénature les protéines, inactive les nucléases (ARNases et ADNases) et libère les acides nucléiques (ADN et ARN) dans la solution.
2. Reliure: En présence du tampon de lyse et d'une solution de liaison, les acides nucléiques se lient spécifiquement à la surface des billes magnétiques recouvertes de silice. Les sels chaotropiques perturbent la structure de l'eau, permettant ainsi au squelette phosphate, chargé négativement, des acides nucléiques d'interagir avec la surface de silice, chargée positivement.
3. Capture et lavages : Un support magnétique (ou une tige magnétique dans un système automatisé) est utilisé pour immobiliser les complexes billes-acides nucléiques contre la paroi du tube/de la plaque. Le surnageant est retiré et les billes sont lavées 2 à 3 fois avec des tampons de lavage contenant de l'éthanol. Ces lavages éliminent les sels, protéines, lipides et autres impuretés sans éluer les acides nucléiques.
4. Élution : Après un dernier lavage et un séchage complet pour éliminer l'éthanol résiduel, les acides nucléiques purs sont élués des billes à l'aide d'un tampon à faible teneur en sel (par exemple, un tampon TE ou de l'eau sans nucléase). Ce tampon d'élution perturbe l'interaction entre la silice et les acides nucléiques, les libérant ainsi dans la solution finale propre.

Flux de travail typique (simplifié)

1. Préparer le lysat : Mélanger l'échantillon avec la protéinase K (si nécessaire) et le tampon de lyse. Incuber jusqu'à lyse complète.
2. Lier: Transférer le lysat dans une plaque à 96 puits profonds. Ajouter les billes magnétiques et la solution de liaison. Bien mélanger pour permettre aux acides nucléiques de se lier aux billes.
3. Capture: Placer la plaque sur un support magnétique jusqu'à ce que la solution soit claire. Aspirer et éliminer le surnageant.
4. Lavage 1 : Ajoutez le tampon de lavage 1, mélangez pour remettre en suspension les billes, capturez sur l'aimant et jetez le surnageant.
5. Lavage 2 : Ajoutez le tampon de lavage 2, mélangez, capturez et jetez le surnageant.
6. Sec: Séchez la pastille de billes à l’air libre pendant quelques minutes pour vous assurer que tout l’éthanol du tampon de lavage s’est évaporé.
7. Éluer : Ajouter le tampon d'élution, bien mélanger, incuber quelques minutes et capturer les billes. Le surnageant contient désormais l'ADN/ARN purifié et est transféré dans une nouvelle plaque ou un nouveau tube.

Applications en aval

L'ADN et l'ARN de haute qualité extraits avec ce kit conviennent à une large gamme d'applications de biologie moléculaire sensibles :

• RT-PCR en temps réel (qRT-PCR) : L'application principale, en particulier pour la détection virale (par exemple, les tests COVID-19).
• PCR
• Séquençage de nouvelle génération (NGS)
• Analyse de puces à ADN
• Clonage
• Diagnostic moléculaire

Résumé

L'espace Kit d'extraction d'ADN/ARN HCY™ 96 est un outil puissant pour les laboratoires moléculaires modernes exigeant efficacité, évolutivité et fiabilité. Son format à 96 puits et billes magnétiques est la référence industrielle pour les laboratoires de diagnostic et de recherche à haut débit, permettant une préparation rapide et précise des acides nucléiques pour les analyses critiques en aval.

Avis de non-responsabilité : Pour le protocole le plus précis et le plus spécifique, reportez-vous toujours aux instructions officielles du fabricant fournies avec le kit.