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ADN polymérase PfuHCY™ Kit ADN polymérase Pfu
ADN polymérase PfuHCY™ Kit ADN polymérase Pfu
ADN polymérase PfuHCY™ Kit ADN polymérase Pfu

Kit d’ADN polymérase HCY™ Pfu

Chat. N° : E0090K101

L'ADN polymérase Pfu, en abrégé Pfuase, est l'une des ADN polymérases haute fidélité les plus couramment utilisées.
L'ADN polymérase HCY™ Pfu est une ADN polymérase hautement stable à la chaleur dérivée de la bactérie thermophile Pyrococcus furiosus, qui a été modifiée par mutation et recombinaison pour avoir une stabilité thermique et une efficacité d'amplification plus élevées que l'ADN polymérase Pfu de type sauvage. Le poids moléculaire de l'enzyme Pfu est de 90 kDa. L'enzyme Pfu possède une activité ADN polymérase 5′-3 'et une activité exonucléase 5′-3'. Le poids moléculaire du Pfu est de 90 kDa. L'enzyme Pfu a une activité ADN polymérase 5'-3' et une activité exonucléase 5'-3', et les produits de PCR ont des extrémités lisses, qui peuvent être directement utilisées pour le clonage à extrémité plate.

DÉTAIL DU PRODUIT
ENQUÊTE

Kit d’ADN polymérase HCY™ Pfu

Étant donné que Pfu a une activité exonucléase de 3 'à 5', le risque d'erreur lors de l'amplification par PCR est considérablement réduit et la fidélité est 10 fois supérieure à celle de l'ADN polymérase Taq. Le taux d'erreur de Pfu est bien inférieur à celui de Taq mais également inférieur à celui de certaines autres ADN polymérases haute fidélité, telles que Vent, DeepVent, Pwo, Tli, etc. Par conséquent, Pfu est souvent le premier choix d'ADN polymérases haute fidélité. Par conséquent, Pfu est souvent préféré en tant qu’ADN polymérase haute fidélité rentable.
L'ADN polymérase HCY™ Pfu a une efficacité d'amplification élevée et une vitesse d'amplification rapide (4 kb/min, 8 fois plus rapide que l'enzyme Pfu ordinaire), ce qui surmonte les défauts de la faible efficacité d'amplification, du faible rendement et de la vitesse d'amplification lente de l'enzyme Pfu ordinaire, et raccourcit considérablement le temps de réaction.

Identifier

L’ADN polymérase HCY™ Pfu est une ADN polymérase Pfu recombinante, génétiquement modifiée par mutation et recombinaison et purifiée par expression dans E. coli.

Les usages

  • PCR haute fidélité, mutation ponctuelle, clonage PCR à double extrémité plate, etc.
  • Les fragments d'ADN amplifiés par l'enzyme Pfu sont à double extrémité plate, qui peuvent être utilisés pour le clonage à double extrémité plate mais pas pour le clonage de vecteur T conventionnel.
  • Le dUTP et le dITP ou les amorces contenant du dUTP et du dITP ne peuvent pas être utilisés dans les réactions d'amplification PCR médiées par les enzymes Pfu.

Définition d'activation

En utilisant l'ADN activé du sperme de saumon comme matrice/amorce, l'activité de 10 nmoles de nucléotides entiers ingérés comme insolubles dans l'acide a été définie comme 1 unité d'activité (U) à 74°C pendant 30 min.

Performances de l’ADN polymérase HCY™ Pfu

ADN polymérase Pfu

Longueurs des fragments d’amplification des polymères d’ADN pfu HCY™

  • Les polymères d’ADN HCY™ pfu peuvent amplifier des fragments de 0.5 kb/1 kb/2 kb/5 kb de différentes longueurs d’ADN λ (0-5 kb) avec une efficacité élevée.
  • M indique un marqueur ADN DL10,00.

ADN polymérase Pfu

Sensibilité à l’amplification des polymères d’ADN HCY™ Pfu

  • Amplification du fragment d'E. coli 300bp avec l'ajout d'une concentration de 0pg/10pg/100pg/1ng/10ng/100ng de matrice ; on peut voir que ce produit peut amplifier les gènes d'E. coli aussi bas qu'une quantité de matrice de 1 ng.
  • NC indique un contrôle négatif pour l’amplification de l’ADN polymérase HCY™ Pfu sans matrice.
  • M indique un marqueur ADN DL500.

ADN polymérase Pfu

Vitesse d’amplification des polymères d’ADN HCY™ Pfu

  • Le temps d'extension était de 30 s/60 s/120 s. pour l'amplification de fragments cibles de taille 0.5 kb/1 kb/2 kb/5 kb ;
  • On constate que le temps de prolongation de 30 sec. et 120 secondes. peut bien amplifier des fragments d'ADN de 2 kb et 5 kb, respectivement, indiquant que le système de réaction PCR avec l'ADN λ comme matrice peut définir le temps d'extension en fonction de 3 kb/min.
  • M indique un marqueur ADN DL10,000.

Contrôle de qualité

  • Pureté électrophorétique SDS-PAGE supérieure à 98 % ;
  • Test fonctionnel : sensibilité, spécificité, reproductibilité de la PCR ;
  • Aucune activité nucléase exogène, aucune endonucléase exogène et contamination par exonucléase ;
  • Aucune expression du résidu d'acide nucléique de l'hôte.

Précautions: Ce produit est uniquement destiné à la recherche scientifique et ne peut pas être utilisé pour des procédures médicales ou de diagnostic chez les humains ou les animaux, ni comme aliment, cosmétique ou produit ménager. Sans autorisation, autorisation ou approbation écrite, ce produit ne peut pas être fabriqué, autorisé à la vente, vendu, importé ou exporté, ni utiliser tous les brevets et marques commerciaux associés au produit.

Liste de colisage

Cat. No.Nom du produitForfait
E0090P01ADN polymérase HCY™ Pfu500U/tube
E0090B01Tampon 10×HCY™ Pfu (avec Mg2+)1 ml / tube
-Manuelle1pc

Conditions de stockage

Pour un stockage à long terme, veuillez conserver à -20 ℃ à l’abri de la lumière. Si une utilisation fréquente est nécessaire, il peut être divisé et stocké à 4 ℃ pour éviter les congélations et décongélations répétées. Après décongélation, il faut bien mélanger pour éviter de générer beaucoup de bulles d’air.

"HCY, des soins de santé pour vous" est notre mission pour toujours. Nous nous engageons à offrir des produits et des services médicaux sûrs et fiables avec nos partenaires mondiaux dignes de confiance. HCY a déjà fourni à l'OMS, à la clinique MAYO, au MGI, au DDC, à l'Université de Yale, à Qorvo, à Quanterix, à Thomas Scientific, au biocapteur SD, à Cardinal Health, à la Cleveland Clinic, à Mars Petcare & LumiraDx, etc. au cours des dernières années.

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