Kit d’ADN polymérase HCY™ Pfu

Kit d’ADN polymérase HCY™ Pfu

Étant donné que Pfu a une activité exonucléase de 3 'à 5', le risque d'erreur lors de l'amplification par PCR est considérablement réduit et la fidélité est 10 fois supérieure à celle de l'ADN polymérase Taq. Le taux d'erreur de Pfu est bien inférieur à celui de Taq mais également inférieur à celui de certaines autres ADN polymérases haute fidélité, telles que Vent, DeepVent, Pwo, Tli, etc. Par conséquent, Pfu est souvent le premier choix d'ADN polymérases haute fidélité. Par conséquent, Pfu est souvent préféré en tant qu’ADN polymérase haute fidélité rentable.
L'ADN polymérase HCY™ Pfu a une efficacité d'amplification élevée et une vitesse d'amplification rapide (4 kb/min, 8 fois plus rapide que l'enzyme Pfu ordinaire), ce qui surmonte les défauts de la faible efficacité d'amplification, du faible rendement et de la vitesse d'amplification lente de l'enzyme Pfu ordinaire, et raccourcit considérablement le temps de réaction.

Identifier

L’ADN polymérase HCY™ Pfu est une ADN polymérase Pfu recombinante, génétiquement modifiée par mutation et recombinaison et purifiée par expression dans E. coli.

Utilisations

• PCR haute fidélité, mutation ponctuelle, clonage PCR à double extrémité plate, etc.
• Les fragments d'ADN amplifiés par l'enzyme Pfu sont à double extrémité plate, qui peuvent être utilisés pour le clonage à double extrémité plate mais pas pour le clonage de vecteur T conventionnel.
• Le dUTP et le dITP ou les amorces contenant du dUTP et du dITP ne peuvent pas être utilisés dans les réactions d'amplification PCR médiées par les enzymes Pfu.

Définition d'activation

En utilisant l'ADN activé du sperme de saumon comme matrice/amorce, l'activité de 10 nmoles de nucléotides entiers ingérés comme insolubles dans l'acide a été définie comme 1 unité d'activité (U) à 74°C pendant 30 min.

Performances de l’ADN polymérase HCY™ Pfu

Longueurs des fragments d’amplification des polymères d’ADN pfu HCY™

• Les polymères d’ADN HCY™ pfu peuvent amplifier des fragments de 0.5 kb/1 kb/2 kb/5 kb de différentes longueurs d’ADN λ (0-5 kb) avec une efficacité élevée.
• M indique un marqueur ADN DL10,00.

Sensibilité à l’amplification des polymères d’ADN HCY™ Pfu

• Amplification du fragment d'E. coli 300bp avec l'ajout d'une concentration de 0pg/10pg/100pg/1ng/10ng/100ng de matrice ; on peut voir que ce produit peut amplifier les gènes d'E. coli aussi bas qu'une quantité de matrice de 1 ng.
• NC indique un contrôle négatif pour l’amplification de l’ADN polymérase HCY™ Pfu sans matrice.
• M indique un marqueur ADN DL500.

Vitesse d’amplification des polymères d’ADN HCY™ Pfu

• Le temps d'extension était de 30 s/60 s/120 s. pour l'amplification de fragments cibles de taille 0.5 kb/1 kb/2 kb/5 kb ;
• On constate que le temps de prolongation de 30 sec. et 120 secondes. peut bien amplifier des fragments d'ADN de 2 kb et 5 kb, respectivement, indiquant que le système de réaction PCR avec l'ADN λ comme matrice peut définir le temps d'extension en fonction de 3 kb/min.
• M indique un marqueur ADN DL10,000.

Contrôle de qualité

• Pureté électrophorétique SDS-PAGE supérieure à 98 % ;
• Test fonctionnel : sensibilité, spécificité, reproductibilité de la PCR ;
• Aucune activité nucléase exogène, aucune endonucléase exogène et contamination par exonucléase ;
• Aucune expression du résidu d'acide nucléique de l'hôte.

Précautions: Ce produit est uniquement destiné à la recherche scientifique et ne peut pas être utilisé pour des procédures médicales ou de diagnostic chez les humains ou les animaux, ni comme aliment, cosmétique ou produit ménager. Sans autorisation, autorisation ou approbation écrite, ce produit ne peut pas être fabriqué, autorisé à la vente, vendu, importé ou exporté, ni utiliser tous les brevets et marques commerciaux associés au produit.

Liste de colisage

Conditions de stockage

Pour un stockage à long terme, veuillez conserver à -20 ℃ à l’abri de la lumière. Si une utilisation fréquente est nécessaire, il peut être divisé et stocké à 4 ℃ pour éviter les congélations et décongélations répétées. Après décongélation, il faut bien mélanger pour éviter de générer beaucoup de bulles d’air.