Milieu 199, milieu de culture cellulaire

M199 est particulièrement adapté à la culture de cellules non transformées. Il est également couramment utilisé en virologie, dans la production de vaccins et dans la culture de cellules épithéliales pancréatiques de rat et de tissus cristallins de souris. Comparé à d'autres milieux basaux, le M199 contient des composants uniques, notamment l'adénine, l'adénosine, l'hypoxanthine, la thymine et d'autres vitamines. Le M199 a deux composants salins équilibrés, le composant salin d'Earle est couramment utilisé dans les environnements CO2, et le composant salin de Hank est utilisé dans les environnements sans CO2.

Ingrédients du Milieu 199

L-glutamine (Glutamine)

La L-glutamine (Glutamine) est un élément nutritif essentiel dans la culture cellulaire, mais elle est instable en solution et se dégrade spontanément. La quantité de L-glutamine peut être arbitrairement ajustée en fonction des besoins de recherche du milieu sans L-glutamine. L'ajout de L-glutamine fraîche ou de ses substituts au moment de l'utilisation est plus bénéfique pour la croissance cellulaire.

La L-alanyl-L-glutamine (Ala-Glu), alanyl-glutamine et alanyl-glutamyl dipeptide, est un additif de culture cellulaire avancé qui peut remplacer directement la L-glutamine dans le milieu de culture cellulaire. La l-glutamine est un nutriment essentiel dans la culture cellulaire, mais elle est instable en solution et sera cependant instable en solution et se dégrade spontanément pour produire de l'ammoniac et de l'acide pyroglutamique, dont l'ammoniac est nocif pour les cellules, alors que la L-alanyl- La L-glutamine est très stable en solution aqueuse et ne se dégrade pas spontanément. Le mécanisme d'utilisation cellulaire est que pendant la culture cellulaire, les cellules libèrent progressivement une peptidase dans le milieu de culture pour hydrolyser le L-alanyl-L-glutamyle en L-alanine et L-glutamine, puis les cellules absorbent et utilisent ces deux hydrolyses. des produits. Le processus d'utilisation cellulaire de L-alanyl-L-glutamyl est similaire à la stratégie de culture d'addition de flux en ce que de faibles niveaux de L-glutamine sont ajoutés en continu au milieu de culture, augmentant ainsi l'utilisation de L-glutamine sans générer d'excès d'ammoniac. , ce qui est plus propice à la croissance cellulaire. Le L-alanyl-L-glutamyl peut remplacer la L-glutamine équimolaire, convient à toutes les cellules, nécessite peu d'adaptation et peut prolonger le temps de culture cellulaire. Il peut également prolonger le temps de culture cellulaire et réduire le nombre de passages, ce qui permet d'économiser du temps et de l'argent. Les cellules cultivées dans un milieu additionné de L-glutamine ont montré une réduction d'activité plus lente que celles cultivées dans un milieu additionné de L-glutamine. La période de retard légèrement plus longue est due au temps nécessaire à la libération de la peptidase et à la digestion du dipeptide.

Solution de pénicilline-streptomycine

La solution de pénicilline-streptomycine, également appelée «antibiotique double», est l'antibiotique le plus couramment utilisé dans la culture in vitro pour prévenir la contamination microbienne, dans laquelle la pénicilline interfère avec la synthèse de la paroi cellulaire bactérienne et est particulièrement efficace contre les bactéries Gram-positives, tandis que la streptomycine inhibe la synthèse des protéines bactériennes en se liant à la sous-unité 30S du ribosome bactérien et est particulièrement efficace contre la streptomycine se lie à la sous-unité 30S du ribosome bactérien et inhibe la synthèse des protéines bactériennes, qui est efficace contre les bactéries Gram-négatives et Gram-positives, mais est particulièrement efficace contre les bactéries Gram-négatives. La combinaison de pénicilline et de streptomycine peut prévenir la plupart des contaminations bactériennes.

Ce produit contient des acides aminés, des vitamines, des sels inorganiques et de nombreux autres composants nécessaires à la culture multiple de cellules, mais ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Le produit doit donc être utilisé avec du sérum ou des additifs sans sérum.

Précautions

Ce produit a été filtré et débactérisé et doit être utilisé avec précaution pour un fonctionnement aseptique afin d'éviter toute contamination.
Ne pas congeler-décongeler le produit afin de conserver la meilleure utilisation du produit.
Ce produit est destiné à la recherche scientifique ou à des études ultérieures uniquement, et non à des fins de diagnostic ou de traitement.