Milieu de culture DMEM F-12 en poudre

Le milieu DMEM/F12 est basé sur le milieu DMEM, ajoutant des nutriments plus riches dans le milieu F12, contenant une variété d'oligo-éléments, et est largement utilisé dans la culture de diverses cellules de mammifères. Dans le même temps, le milieu DMEM/F12 est souvent utilisé comme base pour développer un milieu sans sérum, et il convient également à la culture de cellules de mammifères et à la culture de densité de colonies sous une faible teneur en sérum.DMEM/F-12 est un 1 : 1 mélange de DMEM et de F-12 de Ham, contenant la concentration élevée de glucose, d'acides aminés et de vitamines du DMEM avec divers composants de F-12. Le DMEM/F-12 ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Par conséquent, le DMEM/F-12 peut nécessiter une supplémentation nutritionnelle, généralement avec 10 % de sérum bovin fœtal (FBS). Le DMEM/F-12 utilise un système tampon de bicarbonate de sodium et nécessite donc un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir le pH physiologique.

Pour une large gamme d'applications de culture cellulaire, nous proposons un milieu DMEM/F-12 modifié avec divers composants, ainsi qu'un milieu DMEM/F-12 avec des composants personnalisables.

Ingrédients du milieu de culture DMEM F-12 en poudre

Ce milieu de culture cellulaire en poudre sèche DMEM/F-12 doit être complété avec du bicarbonate de sodium, ajusté au pH et filtré pendant la préparation. La formulation détaillée est la suivante :

Ce milieu de culture cellulaire en poudre sèche DMEM/F-12 doit être complété avec du bicarbonate de sodium, ajusté au pH et filtré pendant la préparation. La formulation détaillée est la suivante :

1. Ajouter 950 ml d'eau distillée dans un récipient de mélange aussi près que possible du volume final.
2. Ajouter le milieu en poudre sec à l'eau à température ambiante (15°C à 30°C) et agiter doucement. Ne chauffez pas l'eau.
3. Rincez l'intérieur du pack pour éliminer tout résidu de poudre.
4. Ajouter 50 mL de solution de NaHCO75 à 3 g/L au milieu de culture.
5. Ajuster le pH à 0.2 à 0.3 unités en dessous du pH de travail final souhaité en ajoutant lentement et en agitant NaOH 1 N ou HCl 1 N. Le pH peut augmenter de 0.1 à 0.3 unité après filtration. Le pH de travail recommandé est de 7.0 à 7.4.
6. Utilisez de l'eau distillée pour ajuster le volume final.
7. Traiter immédiatement le milieu de culture à travers une membrane filtrante de 0.2 µm dans des récipients stériles à l'aide d'un système de filtration à pression positive.