Mélange de nutriments F-12 pour jambon en poudre

Le mélange de nutriments F-12 de Ham contient une gamme de composants plus large que les autres milieux de base, notamment le zinc, la putrescine, l'hypoxanthine et la thymidine. Il est souvent utilisé comme milieu de base pour la culture sans sérum et est particulièrement adapté à la culture unicellulaire et au clonage dans des conditions de faible teneur en sérum. Il est également largement utilisé pour la culture de cellules cancéreuses et de cellules primaires telles que les cellules hépatiques de rat, les cellules épithéliales de la prostate de rat, les chondrocytes, les cellules musculaires de rat, les cellules d'embryon de poulet, etc. Ham's F-12 ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Par conséquent, il peut être nécessaire de le compléter avec des nutriments et nécessite généralement l'ajout de 10% de sérum bovin fœtal (FBS). Ham's F-12 utilise un système tampon de bicarbonate et nécessite donc un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir la valeur physiologique du pH.
Nous proposons diverses formulations de milieux F-12 de Ham modifiés avec différents composants pour une large gamme d'applications de culture cellulaire.

Ingrédients du mélange de nutriments F-12 de jambon en poudre

Ce milieu de culture cellulaire en poudre sèche Ham's F-12 doit être complété avec du bicarbonate de sodium, ajusté au pH et filtré pendant la préparation. Le plan de préparation détaillé est le suivant :

1. Ajouter 950 ml d'eau distillée dans le récipient de mélange aussi près que possible du volume final.
2. Ajouter le milieu de culture sec à l'eau à température ambiante (15°C à 30°C) et agiter doucement. Ne pas chauffer l'eau.
3. Rincez l'intérieur de l'emballage pour enlever toute la poudre résiduelle.
4. Ajouter 15.7 ml de solution de NaHCO75 à 3 g/L au milieu.
5. Ajustez la valeur du pH au pH de travail final souhaité en dessous de 0.2 à 0.3 unités en ajoutant lentement et en agitant NaOH 1 N ou HCl 1 N. La valeur du pH peut augmenter de 0.1 à 0.3 unité après filtration. La valeur de pH de travail recommandée est de 7.5 à 7.9.
6. Ajuster le volume final avec de l'eau distillée.
7. Utiliser immédiatement un système de filtration à pression positive pour filtrer le milieu à travers une membrane filtrante de 0.2 μm dans un récipient stérile.