Milieu MEM α en poudre (milieu essentiel minimum α)

Le MEM α peut être utilisé avec une variété de cellules de mammifères en suspension et adhérentes, y compris les kératinocytes, les astrocytes primaires de rat et les cellules de mélanome humain. MEM α est également disponible dans une version sans nucléoside et peut être utilisé comme milieu de sélection pour DG44 et d'autres cellules négatives DHFR. Ce produit est fabriqué avec des sels équilibrés d'Earle. MEM alpha ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Par conséquent, MEM α nécessite une supplémentation, généralement avec 10% de sérum bovin fœtal (FBS). MEM α utilise un système tampon de bicarbonate de sodium (2.2 g/L) et nécessite donc un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir le pH physiologique. Pour une large gamme d'applications de culture cellulaire, nous proposons des milieux MEM α modifiés dans une variété de compositions, ainsi que des milieux MEM α avec des compositions personnalisées.

Ingrédients du milieu MEM α en poudre

Ce milieu de culture cellulaire en poudre sèche MEM α est formulé avec une supplémentation en bicarbonate de sodium, un ajustement du pH et une filtration. Le schéma de préparation détaillé est le suivant :

1. Ajouter 950 ml d'eau distillée dans un récipient de mélange aussi près que possible du volume final.
2. Ajouter le milieu sec à l'eau à température ambiante (15°C à 30°C) et agiter doucement. Ne chauffez pas l'eau.
3. Rincez l'intérieur du pack pour éliminer tout résidu de poudre.
4. Ajouter 29.3 ml de solution de NaHCO75 à 3 g/L au milieu.
5. Ajuster le pH à 0.2 à 0.3 unités en dessous du pH de travail final souhaité en ajoutant lentement et en agitant NaOH 1 N ou HCl 1 N. Le pH peut augmenter de 0.1 à 0.3 unité après filtration. Le pH de travail recommandé est de 7.1 à 7.4.
6. Ajuster le volume final avec de l'eau distillée.
7. Traiter immédiatement le milieu à travers la fonction de filtration sur membrane d'un filtre de 0.2 μm dans un récipient stérile à l'aide d'un système de pression positive.