Milieu essentiel minimum en poudre (MEM)

Le MEM peut être utilisé pour la culture d'une variété de cellules de mammifères en suspension et adhérentes, y compris HeLa, BHK-21, 293, HEP-2, HT-1080, MCF-7, fibroblastes et astrocytes primaires de rat, etc. Le milieu de culture cellulaire MEM ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Il faut donc généralement ajouter 10% de sérum bovin fœtal (FBS) comme supplément nutritif. Le MEM contient des sels équilibrés d'Earle pour un incubateur à CO2 ou des sels équilibrés de Hanks pour un incubateur sans CO2.
Pour une large gamme d'applications de culture cellulaire, nous proposons des milieux MEM modifiés avec divers composants, ainsi que des milieux MEM avec des composants personnalisables.

Ingrédients du milieu essentiel minimum en poudre (MEM)

Ce milieu de poudre sèche MEM doit être complété avec du bicarbonate de sodium, pH ajusté et filtré lors de la préparation. La méthode de formulation détaillée est la suivante :

1. Ajouter 950 ml d'eau distillée dans un récipient de mélange aussi près que possible du volume final.
2. Ajouter le milieu sec à l'eau à température ambiante (15°C à 30°C) et agiter doucement. Ne chauffez pas l'eau.
3. Rincez l'intérieur du pack pour éliminer tout résidu de poudre.
4. Ajouter 29.3 ml de solution de NaHCO75 à 3 g/L au milieu.
5. Ajuster le pH à 0.2 à 0.3 unités en dessous du pH de travail final souhaité en ajoutant lentement et en agitant NaOH 1 N ou HCl 1 N. Le pH peut augmenter de 0.1 à 0.3 unité après filtration. Le pH de travail recommandé est de 7.1 à 7.4.
6. Ajuster le volume final avec de l'eau distillée.
7. Traiter immédiatement le milieu à travers la fonction de filtration sur membrane d'un filtre de 0.2 μm dans un récipient stérile à l'aide d'un système de pression positive.